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牛巨細(xì)胞病毒探針法熒光定量PCR試劑盒實(shí)驗(yàn)操作

更新時(shí)間:2022-04-12點(diǎn)擊次數(shù):682

牛巨細(xì)胞病毒探針法熒光定量PCR試劑盒實(shí)驗(yàn)操作:

1. 模板制備(樣本制備區(qū))

建議使用配套水生動(dòng)物病害基因組 DNA/RNA 提取試劑盒系列產(chǎn)品,具體過程詳見產(chǎn)品說明書。

2.添加模板(模板添加區(qū),放置于冰盒中進(jìn)行)

請于-20℃條件下保存,有效期 12 個(gè)月

取出所需測試數(shù)的已含有反應(yīng)液 A-TSV-I 的 PCR 管,將試劑*解凍,離心 30 秒,在管蓋上標(biāo)記管名(陰性對照管 NG、樣品 XX、陽性對照管 PG)。打開管蓋向各管管底分別加入 0.8μL B-I 及 0.2μL R-I,蓋上陰性對照管管蓋,其他各管分別沿管壁加入 2μL 模板,順序?yàn)榇郎y樣品模板、PG-TSV-I,依次蓋好各管管蓋,離心 30 秒,立即進(jìn)行擴(kuò)增反應(yīng)。

3. 擴(kuò)增反應(yīng)(擴(kuò)增及產(chǎn)物分析區(qū))

①恒溫儀器 63℃條件下反應(yīng) 60 min。待儀器升溫至 63℃后,新建程序,設(shè)置實(shí)驗(yàn)名稱及反應(yīng)時(shí)間,將步驟 2中離心后的 PCR 反應(yīng)管放入恒溫?zé)晒夥肿訖z測儀,點(diǎn)擊開始檢測。

②若使用熒光定量 PCR 儀,則熒光基團(tuán)選擇 FAM,淬滅基團(tuán)選擇 None,將 63℃ 15 s,63℃ 45 s 作為一個(gè)循環(huán),于 63℃ 45 s 處收集熒光信號,60 個(gè)循環(huán)。

試劑使用須知:

(1)請參照相關(guān)法規(guī)、文獻(xiàn)、MSDS等信息,理解并掌握好試劑的特性,再進(jìn)行安全操作。產(chǎn)品僅用于科研

(2)通常購買試劑時(shí)一定要想到一次性用完。若估算不足有剩余的話,更加注意其他保管和管理。

(3)萬一試劑操作者并非專業(yè)技術(shù)人員。必須在專業(yè)人士的指導(dǎo)監(jiān)督下進(jìn)行操作。對于使用后的廢棄物,不要或者舊的試劑,應(yīng)按照相關(guān)法律法規(guī)正當(dāng)處理。

(4)購買后,請務(wù)必確認(rèn)標(biāo)簽上的注意事項(xiàng);做好預(yù)防顛倒,摔壞的措施和管理體制;在使用前再次確認(rèn)標(biāo)簽上的注意事項(xiàng),做好必要的安全對策;對沒有標(biāo)明其危害特性、有害特性的,也要慎重地進(jìn)行操作;必須帶好防護(hù)用具,小心翼翼進(jìn)行操作。


TEL:021-61210612

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