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遲鈍愛德華菌PCR檢測試劑盒說明書上海聯(lián)祖生物相關(guān)產(chǎn)品:PAI檢測試劑盒 AC阿魏酸乙酯4046-02-0安格洛甙C115909-22-3澳洲茄邊堿20311-51-7巴豆苷巴西蘇木素
產(chǎn)品分類
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1、酶標板:一塊(96孔)
2、 標準品(凍干品): 2瓶,請臨用前15分鐘內(nèi)配制。每瓶以樣品稀釋液稀釋至0.5ml,蓋好后室溫靜置大約10分鐘,同時反復顛倒/搓動以助溶解,其濃度為200 U/L,然后做系列倍比稀釋(注:不要直接在板中進行倍比稀釋),分別配制成200 U/L,100 U/L,50 U/L,25 U/L,12.5 U/L,6.25 U/L,3.12 U/L,樣品稀釋液直接作為空白孔 0 U/L。如配制100 U/L標準品:取0.3ml (不要少于0.3ml )200 U/L的上述標準品加入含有0.3ml樣品稀釋液的Eppendorf管中,混勻即可,其余濃度以此類推。
3、 樣品稀釋液:1×20ml。
4、 檢測稀釋液A:1×10ml。
5、 檢測稀釋液B:1×10ml。
注意事項:1.基礎(chǔ)程序;2.擴增溫度和延伸溫度;3.反應時間;4.循環(huán)次數(shù);5.PCR 反應液的配制;6.PCR技術(shù)的基本原理;7.PCR的反應動力學;8.PCR擴增產(chǎn)物;9.PCR反應體系與反應條件。
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產(chǎn)品名稱 | 遲鈍愛德華菌PCR檢測試劑盒說明書 |
英文名稱 | Edwardsiella tardaPCR |
貨號 | LZP6671 |
實驗過程:
一、試劑準備
1. DNA模板
2.對應目的基因的特異引物(在PCR反應中,新合成的DNA是要接在一小段序列上才能繼續(xù)按照模板DNA復制,而不能從無到有,憑空合成。這一小段序列就是你所要有設(shè)計的引物??梢允荄NA也可以是RNA,一般20多bp,需要根據(jù)你的模板鏈設(shè)計。因此,擴增不同的基因需要設(shè)計不同的引物)
3.10×PCR Buffer
4.2mM dNTPmix:含dATP、dCTP、dGTP、dTTP各2mM
5.Taq酶
二、操作步驟
1.在冰浴中,按以下次序?qū)⒏鞒煞旨尤胍粺o菌0.5ml離心管中。
10×PCR buffer 5μl
dNTP mixl 4μl
引物1(10pM) 2μl
引物2(10PM) 2μl
Taq酶(2U/μl) 1μl
DNA模板(50ng-1μg/μl) 1 μl
加ddH2O至 50 μl
視PCR儀有無熱蓋,不加或添加石蠟油。
2.調(diào)整好反應程序。將上述混合液稍加離心,立即置PCR儀上,執(zhí)行擴增。一般:在93℃預變性3-5min,進入循環(huán)擴增階段:93℃ 40s → 58℃ 30s → 72℃ 60s,循環(huán)30-35次,zui后在72℃ 保溫7min。
3.結(jié)束反應,PCR產(chǎn)物放置于4℃待電泳檢測或-20℃長期保存。
4.PCR的電泳檢測:如在反應管中加有石蠟油,需用100μlLuFang進行抽提反應混合液,以除去石蠟油;否則,直接取5-10μl電泳檢測。
三、注意事項
1.PCR反應應該在一個沒有DNA污染的干凈環(huán)境中進行設(shè)立一個的PCR實驗室。
2.純化模板所選用的方法對污染的風險有極大影響。一般而言,只要能夠得到可靠的結(jié)果,純化的方法越簡單越好。
3.所有試劑都應該沒有核酸和核酸酶的污染。操作過程中均應戴手套。
4.PCR試劑配制應使用zui高質(zhì)量的新鮮雙蒸水,采用0.22μm濾膜過濾除菌或高壓滅菌。
5.試劑都應該以大體積配制,試驗一下是否滿意,然后分裝成僅夠一次使用的量儲存,從而確保實驗與實驗之間的連續(xù)性。
6.試劑或樣品準備過程中都要使用一次性滅菌的塑料瓶和管子,玻璃器皿應洗滌干凈并高壓滅菌。
7.PCR的樣品應在冰浴上化開,并且要充分混勻。檢測步驟:
一、 試劑的準備
從試劑盒中取出熒光PCR反應液(BC-qPCR MIX)、酶混合物(Enzymes MIX),冰上融化并振蕩混勻后,10000rpm離心10s。
設(shè)所需要的PCR反應管管數(shù)為N(N=樣本數(shù)+1管陰性對照+1管陽性對照),每個測試反應體系配制如下表:
試劑 每個反應加入的量 N個反應加入的量
熒光PCR反應液 14µL N×14µL
酶混合物 1 µL N×1 µL
總量 15 µL N×15µL
(1) 計算好各試劑的使用量,加入一適當體積潔凈離心管中,充分混勻,10000rpm離心10s,向設(shè)定的N個PCR反應管中分別加入15μL熒光PCR反應液,向每管中加入處理后樣品或陰性對照(NTC)和陽性對照(BC-PTC)5μL,10000rpm瞬時離心10秒。
7.2 qPCR反應條件
將各反應管放入定量PCR儀器的反應槽內(nèi)。
推薦循環(huán)條件:
1循環(huán) 50℃ for 2 min
預變性 1循環(huán) 95℃ for 10 min
PCR擴增 40循環(huán) 95℃ for 15 sec
60℃ for 60 sec
在60℃延伸時收集熒光信號。報告基團:設(shè)置為FAM。淬滅基團:NONE,請勿選擇ROX參比熒光。
羅漢果苷VI 89590-98-7實驗方法Anti-CD32(FCGR2C) Antibody研究領(lǐng)域 心血管 發(fā)育生物學 染色質(zhì)和核信號 信號轉(zhuǎn)導 干細胞 生長因子和激素 轉(zhuǎn)錄調(diào)節(jié)因子
甜茶苷64849-39-4實驗步驟Anti-CD37 Antibody研究領(lǐng)域 細胞生物 信號轉(zhuǎn)導
槐角堿*Anti-CD3EAP Antibody研究領(lǐng)域 腫瘤 細胞生物 腫瘤細胞生物標志物 表觀遺傳學
氧代川南亭堿價格Anti-CD53 Antibody研究領(lǐng)域 心血管 細胞生物 神經(jīng)生物學 通道蛋白
氧化槐果堿26904-64-3價格Anti-CD81 Antibody研究領(lǐng)域 腫瘤 細胞生物 免疫學 細胞凋亡
7-羥基93-35-6實驗步驟Anti-CD84 Antibody研究領(lǐng)域 細胞生物 神經(jīng)生物學 信號轉(zhuǎn)導 細胞凋亡
異甘草素961-29-5*Anti-CD98 Antibody研究領(lǐng)域 細胞生物 信號轉(zhuǎn)導 細胞凋亡
羽扇豆醇545-47-1 實驗步驟Anti-CD93 Antibody研究領(lǐng)域 細胞生物 信號轉(zhuǎn)導 干細胞 轉(zhuǎn)錄調(diào)節(jié)因子 激酶和磷酸酶 細胞表面分子 細胞外基質(zhì) 表觀遺傳學
D-丙氨酸使用說明書Anti-CD97 Antibody研究領(lǐng)域 細胞生物 細胞凋亡 淋巴細胞 b-淋巴細胞
BOC-L-丙氨酸實驗步驟Anti-CD70 Antibody研究領(lǐng)域 腫瘤 細胞生物
N-硝基-L-精氨酸甲酯使用說明書Anti-CD99 Antibody研究領(lǐng)域 發(fā)育生物學 神經(jīng)生物學 信號轉(zhuǎn)導 細胞凋亡 細胞周期蛋白
DL-賴氨酸保存Anti-CDC14A Antibody研究領(lǐng)域 細胞生物 細胞周期蛋白 細胞分化
DL-苯丙氨酸價格Anti-CDC16 Antibody研究領(lǐng)域 腫瘤 免疫學 信號轉(zhuǎn)導 G蛋白偶聯(lián)受體 G蛋白信號
L-精氨酸L-谷氨酸鹽實驗步驟Anti-CDC23 Antibody研究領(lǐng)域 腫瘤 免疫學 表觀遺傳學
肌氨酸甲酯鹽酸鹽價格Anti-CDC25C Antibody研究領(lǐng)域 細胞生物 干細胞 細胞外基質(zhì)
2-乙胺 二氫芳樟醇 N-Boc-L--2-羧酸
4-甲酯甲酯 四乙二醇單十二烷基醚 3--4-基異酸酯
2 2'-聯(lián)嘧啶 2,2,3,3-四-1-丙醇 7-基-1,3-二磺酸
4--3-硝基苯 2,2,3,3-四-1,4-丁烷二醇 2-基-3,6-二磺酸單鈉鹽
Vinyl bromide 溴 593-60-2
Benzylchlorom 芐基甲基醚 3587-60-8
1-Decene 1-癸烯 872-05-9
Thioanisole 基硫醚 100-68-5
大鼠早老素1(PS-1)ELISA試劑盒 96T/48T 試劑盒 組裝/原裝
人血管緊張素Ⅰ(Ang-Ⅰ)免疫試劑盒 Human angiotension Ⅰ,Ang-Ⅰ ELISA Kit
人抗Q熱抗體(ai-Q-Ab)ELISA試劑盒 ,英文名: ai-Q-Ab ELISA Kit
RatLeptinSolubleReceptor,sLRELISA試劑盒大鼠可溶性瘦素受體(sLR)ELISA試劑盒規(guī)格:96T/48T
Humangolgiprotein73,GP-73ELISA試劑盒人高爾基蛋白73(GP-73)ELISA試劑盒規(guī)格:96T/48T
HumanLactateDehydrogenase,LDHELISAKit人乳酸脫氫酶(LDH)ELISA試劑盒規(guī)格:96T/48T
遲鈍愛德華菌PCR檢測試劑盒說明書4-(Bromomethyl)biphenyl,97%表面活性劑 5G
4-tert-Butyliodobenzene,98%表面活性劑 1G
(2-Bromoethyl)benzene,98%表面活性劑 25G
Ethyl α-bromoisobutyrate,98%通用試劑 25G
Methyl 2-bromobenzoate,98%通用試劑 25ML
Ethyl 2-oxocyclopentanecarboxylate,≥9...通用試劑 25ML
Methyl phenylacetate,≥98%通用試劑 250G
Didecyl phthalate,≥90.0%通用試劑 25G
(1-Bromoethyl)benzene,97%表面活性劑 25G
1,4-Difluorobenzene,98%表面活性劑 5G
4-Methylbenzyl bromide,≥97.0%表面活性劑 5G
4,4'-Diiodobiphenyl,98%表面活性劑 5G
1,4-Diiodobenzene,≥98.0%表面活性劑 5G
3-Chlorobenzyl bromide,97%表面活性劑 10G
α,α'-Dibromo-p-xylene,≥98.0%表面活性劑 5G