組成及試劑配制:
1、酶標(biāo)板：一塊（96孔）
2、 標(biāo)準(zhǔn)品（凍干品）： 2瓶，請(qǐng)臨用前15分鐘內(nèi)配制。每瓶以樣品稀釋液稀釋至0.5ml，蓋好后室溫靜置大約10分鐘，同時(shí)反復(fù)顛倒/搓動(dòng)以助溶解，其濃度為200 U/L，然后做系列倍比稀釋（注：不要直接在板中進(jìn)行倍比稀釋），分別配制成200 U/L，100 U/L，50 U/L，25 U/L，12.5 U/L，6.25 U/L，3.12 U/L，樣品稀釋液直接作為空白孔 0 U/L。如配制100 U/L標(biāo)準(zhǔn)品：取0.3ml （不要少于0.3ml ）200 U/L的上述標(biāo)準(zhǔn)品加入含有0.3ml樣品稀釋液的Eppendorf管中，混勻即可，其余濃度以此類推。
3、 樣品稀釋液：1×20ml。
4、 檢測(cè)稀釋液A：1×10ml。
5、 檢測(cè)稀釋液B：1×10ml。
注意事項(xiàng)：1．基礎(chǔ)程序；2．?dāng)U增溫度和延伸溫度；3．反應(yīng)時(shí)間；4．循環(huán)次數(shù)；5．PCR 反應(yīng)液的配制；6．PCR技術(shù)的基本原理；7．PCR的反應(yīng)動(dòng)力學(xué)；8．PCR擴(kuò)增產(chǎn)物；9．PCR反應(yīng)體系與反應(yīng)條件。

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實(shí)驗(yàn)過程：
一、試劑準(zhǔn)備
1. DNA模板
2．對(duì)應(yīng)目的基因的特異引物（在PCR反應(yīng)中，新合成的DNA是要接在一小段序列上才能繼續(xù)按照模板DNA復(fù)制，而不能從無到有，憑空合成。這一小段序列就是你所要有設(shè)計(jì)的引物?？梢允荄NA也可以是RNA，一般20多bp，需要根據(jù)你的模板鏈設(shè)計(jì)。因此，擴(kuò)增不同的基因需要設(shè)計(jì)不同的引物）
3．10×PCR Buffer
4．2mM dNTPmix：含dATP、dCTP、dGTP、dTTP各2mM
5．Taq酶
二、操作步驟
1．在冰浴中，按以下次序?qū)⒏鞒煞旨尤胍粺o菌0.5ml離心管中。
10×PCR buffer             5μl
dNTP mixl                 4μl
引物1（10pM）               2μl
引物2（10PM）              2μl
Taq酶（2U/μl）            1μl
DNA模板（50ng-1μg/μl）　　　 1 μl
加ddH2O至               50 μl
視PCR儀有無熱蓋，不加或添加石蠟油。
2．調(diào)整好反應(yīng)程序。將上述混合液稍加離心，立即置PCR儀上，執(zhí)行擴(kuò)增。一般：在93℃預(yù)變性3-5min，進(jìn)入循環(huán)擴(kuò)增階段：93℃ 40s → 58℃ 30s → 72℃ 60s，循環(huán)30-35次，zui后在72℃ 保溫7min。
3．結(jié)束反應(yīng)，PCR產(chǎn)物放置于4℃待電泳檢測(cè)或-20℃長(zhǎng)期保存。
4．PCR的電泳檢測(cè)：如在反應(yīng)管中加有石蠟油，需用100μlLuFang進(jìn)行抽提反應(yīng)混合液，以除去石蠟油；否則，直接取5-10μl電泳檢測(cè)。
三、注意事項(xiàng)
１．PCR反應(yīng)應(yīng)該在一個(gè)沒有DNA污染的干凈環(huán)境中進(jìn)行設(shè)立一個(gè)的PCR實(shí)驗(yàn)室。
２．純化模板所選用的方法對(duì)污染的風(fēng)險(xiǎn)有極大影響。一般而言，只要能夠得到可靠的結(jié)果，純化的方法越簡(jiǎn)單越好。
３．所有試劑都應(yīng)該沒有核酸和核酸酶的污染。操作過程中均應(yīng)戴手套。
４．PCR試劑配制應(yīng)使用zui高質(zhì)量的新鮮雙蒸水，采用0.22μm濾膜過濾除菌或高壓滅菌。
５．試劑都應(yīng)該以大體積配制，試驗(yàn)一下是否滿意，然后分裝成僅夠一次使用的量?jī)?chǔ)存，從而確保實(shí)驗(yàn)與實(shí)驗(yàn)之間的連續(xù)性。
６．試劑或樣品準(zhǔn)備過程中都要使用一次性滅菌的塑料瓶和管子，玻璃器皿應(yīng)洗滌干凈并高壓滅菌。
７．PCR的樣品應(yīng)在冰浴上化開，并且要充分混勻。檢測(cè)步驟：
一、 試劑的準(zhǔn)備
從試劑盒中取出熒光PCR反應(yīng)液(BC-qPCR MIX)、酶混合物(Enzymes MIX)，冰上融化并振蕩混勻后，10000rpm離心10s。
設(shè)所需要的PCR反應(yīng)管管數(shù)為N(N=樣本數(shù)+1管陰性對(duì)照+1管陽性對(duì)照)，每個(gè)測(cè)試反應(yīng)體系配制如下表：
試劑 每個(gè)反應(yīng)加入的量 N個(gè)反應(yīng)加入的量
熒光PCR反應(yīng)液 14µL N×14µL
酶混合物 1 µL N×1 µL
總量 15 µL N×15µL
（1） 計(jì)算好各試劑的使用量，加入一適當(dāng)體積潔凈離心管中，充分混勻，10000rpm離心10s，向設(shè)定的N個(gè)PCR反應(yīng)管中分別加入15μL熒光PCR反應(yīng)液，向每管中加入處理后樣品或陰性對(duì)照(NTC)和陽性對(duì)照(BC-PTC)5μL，10000rpm瞬時(shí)離心10秒。
7.2 qPCR反應(yīng)條件
將各反應(yīng)管放入定量PCR儀器的反應(yīng)槽內(nèi)。
推薦循環(huán)條件:
1循環(huán) 50℃ for 2 min
預(yù)變性 1循環(huán) 95℃ for 10 min
PCR擴(kuò)增 40循環(huán) 95℃ for 15 sec
60℃ for 60 sec
在60℃延伸時(shí)收集熒光信號(hào)。報(bào)告基團(tuán)：設(shè)置為FAM。淬滅基團(tuán)：NONE，請(qǐng)勿選擇ROX參比熒光。
壯觀霉素溶液 ,50mg/mL10mL多少錢Anti-Mkl1/MRTF-A研究領(lǐng)域  腫瘤 細(xì)胞生物 神經(jīng)生物學(xué) 信號(hào)轉(zhuǎn)導(dǎo) 干細(xì)胞 細(xì)胞粘附分子

大鼠腎實(shí)質(zhì)細(xì)胞價(jià)格Anti-MTLC研究領(lǐng)域  腫瘤 細(xì)胞生物 神經(jīng)生物學(xué) 信號(hào)轉(zhuǎn)導(dǎo) 干細(xì)胞

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TE671 subline .2（人橫紋肌肉瘤細(xì)胞）現(xiàn)貨供應(yīng)Anti-MTF-1研究領(lǐng)域  腫瘤 細(xì)胞生物 免疫學(xué) 神經(jīng)生物學(xué) 信號(hào)轉(zhuǎn)導(dǎo) 轉(zhuǎn)錄調(diào)節(jié)因子 腫瘤細(xì)胞生物標(biāo)志物

小鼠成纖維細(xì)胞*培養(yǎng)基現(xiàn)貨供應(yīng)Anti-MYSM1研究領(lǐng)域  腫瘤 細(xì)胞生物 信號(hào)轉(zhuǎn)導(dǎo) 轉(zhuǎn)錄調(diào)節(jié)因子 表觀遺傳學(xué)

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魚乙酰膽堿酯酶（AChE）elisa試劑盒Anti-MCR/NR3C2/Mineralocorticoid receptor研究領(lǐng)域  腫瘤 細(xì)胞生物 信號(hào)轉(zhuǎn)導(dǎo) 細(xì)胞凋亡 細(xì)胞周期蛋白 新陳代謝 表觀遺傳學(xué)

雙特異性絲裂原活化蛋白激酶5（MAP2K5）elisa試劑盒Anti-MAVS研究領(lǐng)域  腫瘤 細(xì)胞生物 染色質(zhì)和核信號(hào) 細(xì)胞周期蛋白 表觀遺傳學(xué)

人β-防御素3 elisa試劑盒Anti-Methionine adesyltransferase研究領(lǐng)域  細(xì)胞生物 信號(hào)轉(zhuǎn)導(dǎo) 激酶和磷酸酶

燈盞花乙素甲酯119262-68-9實(shí)驗(yàn)方法Anti-MHC class I antigen B 15研究領(lǐng)域  腫瘤 細(xì)胞生物 神經(jīng)生物學(xué) 信號(hào)轉(zhuǎn)導(dǎo) 轉(zhuǎn)錄調(diào)節(jié)因子

沙氏腦心浸液瓊脂使用說明書Anti-mucin 5B/Muc5B研究領(lǐng)域  腫瘤 細(xì)胞生物 神經(jīng)生物學(xué) 信號(hào)轉(zhuǎn)導(dǎo) 轉(zhuǎn)錄調(diào)節(jié)因子

人參皂苷Rb1Cyclin D3(C-term)  周期素D3抗原V.cholera Ogawa  01群小川型霍亂弧菌抗體

人參皂苷Rb2CYP3A4(Cytochrome p450 3A4)  細(xì)胞色素P450 3A4抗原V.cholera Ogawa  01群稻葉型霍亂弧菌抗體

人參皂苷Rb3Cyr61/IGFBP10/CCN1(cysteine rich 61)  富半胱氨酸肝素結(jié)合蛋白61抗原UXT/Ubiquitously expressed transcript  廣泛表達(dá)轉(zhuǎn)錄蛋白UXT抗體

人參皂苷Rg1HCMV UL23/HHV5 UL23(Human Cytomegalovirus UL23 Gene)  人巨細(xì)胞病毒UL23抗原UVRAG/DHTX  輻射耐受相關(guān)蛋白DHTX抗體

人參皂苷Rg2DAD1 (dopamine D1 receptor)  多巴胺受體-D1抗原UTS2R/GPCR GPR14  G蛋白偶聯(lián)受體14抗體

人參皂苷Rg3DRD3 receptor(dopamine D3 receptor)  多巴胺受體-D3抗原UTS2D  尾加壓素2相關(guān)肽抗體

人參皂苷Rh1DRD4 receptor peptide  多巴胺受體-D4抗原UTP14A/SDCCAG16  結(jié)腸癌抗原16抗體

人參皂苷Rh2DRD5 receptor(dopamine D5 receptor)  多巴胺受體-D5抗原Uteroglobin  珠蛋白抗體

人參皂苷Rh3DBH (Dopamine- Beta-Hydroxylase)  多巴胺β羥化酶（抗原）USP9X  泛素特異性蛋白酶9X抗體

人參皂苷RcDCC (Deleted in colorectal cancer gene)  結(jié)直腸癌缺失基因抗原USP3  去泛素化酶3抗體
人分枝桿菌PCR檢測(cè)試劑盒廠家雞胰高血糖素(GC)ELISA試劑盒  *shēng huà shì jì  容量：100克

雞乙酰乙酸檢測(cè)(ACAC)ELISA試劑盒  *shēng huà shì jì  容量：RT250毫克

雞脂多糖/內(nèi)毒素(LPS)ELISA試劑盒  *shēng huà shì jì  容量：RT5克

雞腫瘤壞死因子α(TNF-α)ELISA試劑盒  *shēng huà shì jì  容量：保存：-20℃100毫克

雞腫瘤壞死因子相關(guān)凋亡誘導(dǎo)配體3(TRAIL-R3)ELISA試劑盒  *shēng huà shì jì  容量：2～8℃100克

雞主要組織相容性復(fù)合體(MHC/B)ELISA試劑盒  *shēng huà shì jì  容量：1公斤

雞轉(zhuǎn)化生長(zhǎng)因子β1(TGF-β1)ELISA試劑盒  *shēng huà shì jì  容量：保存：-20℃250毫克

雞轉(zhuǎn)化生長(zhǎng)因子β2(TGF-β2)ELISA試劑盒  *shēng huà shì jì  容量：25克