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難辨梭狀芽胞桿菌PCR檢測試劑盒價格上海聯(lián)祖生物相關產(chǎn)品:溴代金剛烷D-(>99%,BC)PFKP (D2E5) Rabbit mAb2-硝基烷山羊CD14分子(CDl4)ELISA試劑盒Phospho-Estrogen Receptor alpha (Ser104/106) 酸化雌激素受體α100 ul
產(chǎn)品分類
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1、酶標板:一塊(96孔)
2、 標準品(凍干品): 2瓶,請臨用前15分鐘內(nèi)配制。每瓶以樣品稀釋液稀釋至0.5ml,蓋好后室溫靜置大約10分鐘,同時反復顛倒/搓動以助溶解,其濃度為200 U/L,然后做系列倍比稀釋(注:不要直接在板中進行倍比稀釋),分別配制成200 U/L,100 U/L,50 U/L,25 U/L,12.5 U/L,6.25 U/L,3.12 U/L,樣品稀釋液直接作為空白孔 0 U/L。如配制100 U/L標準品:取0.3ml (不要少于0.3ml )200 U/L的上述標準品加入含有0.3ml樣品稀釋液的Eppendorf管中,混勻即可,其余濃度以此類推。
3、 樣品稀釋液:1×20ml。
4、 檢測稀釋液A:1×10ml。
5、 檢測稀釋液B:1×10ml。
注意事項:1.基礎程序;2.擴增溫度和延伸溫度;3.反應時間;4.循環(huán)次數(shù);5.PCR 反應液的配制;6.PCR技術的基本原理;7.PCR的反應動力學;8.PCR擴增產(chǎn)物;9.PCR反應體系與反應條件。
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產(chǎn)品名稱 | 難辨梭狀芽胞桿菌PCR檢測試劑盒價格 |
規(guī)格 | 50T |
貨號 | LZP7697 |
實驗過程:
一、試劑準備
1. DNA模板
2.對應目的基因的特異引物(在PCR反應中,新合成的DNA是要接在一小段序列上才能繼續(xù)按照模板DNA復制,而不能從無到有,憑空合成。這一小段序列就是你所要有設計的引物??梢允荄NA也可以是RNA,一般20多bp,需要根據(jù)你的模板鏈設計。因此,擴增不同的基因需要設計不同的引物)
3.10×PCR Buffer
4.2mM dNTPmix:含dATP、dCTP、dGTP、dTTP各2mM
5.Taq酶
二、操作步驟
1.在冰浴中,按以下次序將各成分加入一無菌0.5ml離心管中。
10×PCR buffer 5μl
dNTP mixl 4μl
引物1(10pM) 2μl
引物2(10PM) 2μl
Taq酶(2U/μl) 1μl
DNA模板(50ng-1μg/μl) 1 μl
加ddH2O至 50 μl
視PCR儀有無熱蓋,不加或添加石蠟油。
2.調(diào)整好反應程序。將上述混合液稍加離心,立即置PCR儀上,執(zhí)行擴增。一般:在93℃預變性3-5min,進入循環(huán)擴增階段:93℃ 40s → 58℃ 30s → 72℃ 60s,循環(huán)30-35次,zui后在72℃ 保溫7min。
3.結束反應,PCR產(chǎn)物放置于4℃待電泳檢測或-20℃長期保存。
4.PCR的電泳檢測:如在反應管中加有石蠟油,需用100μlLuFang進行抽提反應混合液,以除去石蠟油;否則,直接取5-10μl電泳檢測。
三、注意事項
1.PCR反應應該在一個沒有DNA污染的干凈環(huán)境中進行設立一個的PCR實驗室。
2.純化模板所選用的方法對污染的風險有極大影響。一般而言,只要能夠得到可靠的結果,純化的方法越簡單越好。
3.所有試劑都應該沒有核酸和核酸酶的污染。操作過程中均應戴手套。
4.PCR試劑配制應使用zui高質量的新鮮雙蒸水,采用0.22μm濾膜過濾除菌或高壓滅菌。
5.試劑都應該以大體積配制,試驗一下是否滿意,然后分裝成僅夠一次使用的量儲存,從而確保實驗與實驗之間的連續(xù)性。
6.試劑或樣品準備過程中都要使用一次性滅菌的塑料瓶和管子,玻璃器皿應洗滌干凈并高壓滅菌。
7.PCR的樣品應在冰浴上化開,并且要充分混勻。檢測步驟:
一、 試劑的準備
從試劑盒中取出熒光PCR反應液(BC-qPCR MIX)、酶混合物(Enzymes MIX),冰上融化并振蕩混勻后,10000rpm離心10s。
設所需要的PCR反應管管數(shù)為N(N=樣本數(shù)+1管陰性對照+1管陽性對照),每個測試反應體系配制如下表:
試劑 每個反應加入的量 N個反應加入的量
熒光PCR反應液 14µL N×14µL
酶混合物 1 µL N×1 µL
總量 15 µL N×15µL
(1) 計算好各試劑的使用量,加入一適當體積潔凈離心管中,充分混勻,10000rpm離心10s,向設定的N個PCR反應管中分別加入15μL熒光PCR反應液,向每管中加入處理后樣品或陰性對照(NTC)和陽性對照(BC-PTC)5μL,10000rpm瞬時離心10秒。
7.2 qPCR反應條件
將各反應管放入定量PCR儀器的反應槽內(nèi)。
推薦循環(huán)條件:
1循環(huán) 50℃ for 2 min
預變性 1循環(huán) 95℃ for 10 min
PCR擴增 40循環(huán) 95℃ for 15 sec
60℃ for 60 sec
在60℃延伸時收集熒光信號。報告基團:設置為FAM。淬滅基團:NONE,請勿選擇ROX參比熒光。
(環(huán)己氨基 )-1-磺酸鈉(分子生物學級)NRF2 (D1Z9C) XP®Rabbit mAb1,6-雙(二基膦基)己烷
血紅素(>95%,BR)Ubiquitin E3 Ligase Complex Antibody Sampler Kit六甲基二硅烷
聚二800Immunofluorescence Application Solutions Kit1--1-烷
炔雌;炔雌環(huán)戊Atlastin-1 (D2E6) Rabbit mAb茶螺烷
酸二酯酶 (比活度:>20 U/mg,BC)APBA2 (D8A6) Rabbit mAb溴甲基環(huán)己烷
化啶(>95% (HPLC),BC)IRF-1 (D5E4) XP® Rabbit mAb (PE Conjuga)溴甲基環(huán)丁烷
十二烷基磺酸鈉(>95%,ch Grade)Galectin-3/LGALS3 Antibody2-(3,環(huán)氧環(huán)己基)基*氧基硅烷
硅酸鈉九水(>98%,BR)HMGN1 (D1I5O) Rabbit mAb2-溴甲基-1,二氧戊烷
多聚酸鈉(>98%,BR)NXF1 (D5X4G) Rabbit mAb(S)-叔丁氧羰基氨基吡咯烷
鹽酸三(>98%,BR)PathScan®Phospho-Ron (panTyr) Sandwich ELISA Kit(R)-叔丁氧羰基氨基吡咯烷
5-溴-吲哚基-β-D-吡喃半糖苷(>98%,BR)Aurora A/B Substra Antibody Sampler Kit二氮雜18-冠-6
酸氫二鈉二水Human IL-17A Neutralizing (D13C2) Rabbit mAb4,7,13,16,21-五氧雜-1,10-二氮雜二環(huán)[8.8.5]廿三烷
中性蛋白酶LC3A/B (D3U4C) XP® Rabbit mAb三基硅烷
聚二200LC3A/B (D3U4C) XP® Rabbit mAb六溴環(huán)十二烷
銻(> 98%,BR)Procaspase Antibody Sampler Kit溴三
結晶碳酸鈉(>99%,BR)MEIS1/2 AntibodyS-1-溴-2-甲基丁烷
中性氧化鋁(BR)Phospho-Gab1 (Tyr659) Antibody1-溴代金剛烷
D-(>99%,BC)PFKP (D2E5) Rabbit mAb2-硝基烷
山羊CD14分子(CDl4)ELISA試劑盒Phospho-Estrogen Receptor alpha (Ser104/106) 酸化雌激素受體α100 ul
山羊Ⅰ型膠原C端肽(CTX-Ⅰ)ELISA試劑盒ER-Alpha 雌激素受體α(用于wesrn blot)100 ul
ELISA試劑盒ER-Alpha 雌激素受體α100 ul
解脲脲原體(UU-Ab)ELISA試劑盒ER-alpha/beta 雌激素受體α/β100 ul
睫狀神經(jīng)營養(yǎng)因子(CNTF)ELISA試劑盒ER-beta 雌激素受體β 100 ul
結核菌素(Tuberculin)ELISA試劑盒ER-Beta 雌激素受體β100 ul
結核菌桿IgM(TB-Ab IgM)ELISA試劑盒EpCAM/CD326 上皮特異性抗原100 ul
結核菌桿IgG(TB-Ab IgG)ELISA試劑盒ET-1 內(nèi)皮素-1100 ul
結核菌桿(TB)(IgA)ELISA試劑盒ET-1 內(nèi)皮素-11Kit
難辨梭狀芽胞桿菌PCR檢測試劑盒價格1號染色體開放閱讀框141抗體Pashane中文名:別名:2',6'-Dihydroxy-3',4'-dimethoxychalcone分子式:C17H16O5
1號染色體開放閱讀框144抗體Methyllucidone中文名:別名:分子式:C16H14O4
1號染色體開放閱讀框146抗體Lucidone中文名:別名:分子式:C15H12O4
1號染色體開放閱讀框150抗體Ethyllucidone中文名:別名:分子式:C17H16O4
1號染色體開放閱讀框156抗體Pistrobin chalcone中文名:球松素查爾酮別名:2',6'-Dihydroxy-4'-methoxychalcone分子式:C16H14O4