組成及試劑配制:
1、酶標(biāo)板：一塊（96孔）
2、 標(biāo)準(zhǔn)品（凍干品）： 2瓶，請臨用前15分鐘內(nèi)配制。每瓶以樣品稀釋液稀釋至0.5ml，蓋好后室溫靜置大約10分鐘，同時反復(fù)顛倒/搓動以助溶解，其濃度為200 U/L，然后做系列倍比稀釋（注：不要直接在板中進(jìn)行倍比稀釋），分別配制成200 U/L，100 U/L，50 U/L，25 U/L，12.5 U/L，6.25 U/L，3.12 U/L，樣品稀釋液直接作為空白孔 0 U/L。如配制100 U/L標(biāo)準(zhǔn)品：取0.3ml （不要少于0.3ml ）200 U/L的上述標(biāo)準(zhǔn)品加入含有0.3ml樣品稀釋液的Eppendorf管中，混勻即可，其余濃度以此類推。
3、 樣品稀釋液：1×20ml。
4、 檢測稀釋液A：1×10ml。
5、 檢測稀釋液B：1×10ml。
注意事項：1．基礎(chǔ)程序；2．?dāng)U增溫度和延伸溫度；3．反應(yīng)時間；4．循環(huán)次數(shù)；5．PCR 反應(yīng)液的配制；6．PCR技術(shù)的基本原理；7．PCR的反應(yīng)動力學(xué)；8．PCR擴(kuò)增產(chǎn)物；9．PCR反應(yīng)體系與反應(yīng)條件。

?

實(shí)驗過程：
一、試劑準(zhǔn)備
1. DNA模板
2．對應(yīng)目的基因的特異引物（在PCR反應(yīng)中，新合成的DNA是要接在一小段序列上才能繼續(xù)按照模板DNA復(fù)制，而不能從無到有，憑空合成。這一小段序列就是你所要有設(shè)計的引物。可以是DNA也可以是RNA，一般20多bp，需要根據(jù)你的模板鏈設(shè)計。因此，擴(kuò)增不同的基因需要設(shè)計不同的引物）
3．10×PCR Buffer
4．2mM dNTPmix：含dATP、dCTP、dGTP、dTTP各2mM
5．Taq酶
二、操作步驟
1．在冰浴中，按以下次序?qū)⒏鞒煞旨尤胍粺o菌0.5ml離心管中。
10×PCR buffer             5μl
dNTP mixl                 4μl
引物1（10pM）               2μl
引物2（10PM）              2μl
Taq酶（2U/μl）            1μl
DNA模板（50ng-1μg/μl）　　　 1 μl
加ddH2O至               50 μl
視PCR儀有無熱蓋，不加或添加石蠟油。
2．調(diào)整好反應(yīng)程序。將上述混合液稍加離心，立即置PCR儀上，執(zhí)行擴(kuò)增。一般：在93℃預(yù)變性3-5min，進(jìn)入循環(huán)擴(kuò)增階段：93℃ 40s → 58℃ 30s → 72℃ 60s，循環(huán)30-35次，zui后在72℃ 保溫7min。
3．結(jié)束反應(yīng)，PCR產(chǎn)物放置于4℃待電泳檢測或-20℃長期保存。
4．PCR的電泳檢測：如在反應(yīng)管中加有石蠟油，需用100μlLuFang進(jìn)行抽提反應(yīng)混合液，以除去石蠟油；否則，直接取5-10μl電泳檢測。
三、注意事項
１．PCR反應(yīng)應(yīng)該在一個沒有DNA污染的干凈環(huán)境中進(jìn)行設(shè)立一個的PCR實(shí)驗室。
２．純化模板所選用的方法對污染的風(fēng)險有極大影響。一般而言，只要能夠得到可靠的結(jié)果，純化的方法越簡單越好。
３．所有試劑都應(yīng)該沒有核酸和核酸酶的污染。操作過程中均應(yīng)戴手套。
４．PCR試劑配制應(yīng)使用zui高質(zhì)量的新鮮雙蒸水，采用0.22μm濾膜過濾除菌或高壓滅菌。
５．試劑都應(yīng)該以大體積配制，試驗一下是否滿意，然后分裝成僅夠一次使用的量儲存，從而確保實(shí)驗與實(shí)驗之間的連續(xù)性。
６．試劑或樣品準(zhǔn)備過程中都要使用一次性滅菌的塑料瓶和管子，玻璃器皿應(yīng)洗滌干凈并高壓滅菌。
７．PCR的樣品應(yīng)在冰浴上化開，并且要充分混勻。檢測步驟：
一、 試劑的準(zhǔn)備
從試劑盒中取出熒光PCR反應(yīng)液(BC-qPCR MIX)、酶混合物(Enzymes MIX)，冰上融化并振蕩混勻后，10000rpm離心10s。
設(shè)所需要的PCR反應(yīng)管管數(shù)為N(N=樣本數(shù)+1管陰性對照+1管陽性對照)，每個測試反應(yīng)體系配制如下表：
試劑 每個反應(yīng)加入的量 N個反應(yīng)加入的量
熒光PCR反應(yīng)液 14µL N×14µL
酶混合物 1 µL N×1 µL
總量 15 µL N×15µL
（1） 計算好各試劑的使用量，加入一適當(dāng)體積潔凈離心管中，充分混勻，10000rpm離心10s，向設(shè)定的N個PCR反應(yīng)管中分別加入15μL熒光PCR反應(yīng)液，向每管中加入處理后樣品或陰性對照(NTC)和陽性對照(BC-PTC)5μL，10000rpm瞬時離心10秒。
7.2 qPCR反應(yīng)條件
將各反應(yīng)管放入定量PCR儀器的反應(yīng)槽內(nèi)。
推薦循環(huán)條件:
1循環(huán) 50℃ for 2 min
預(yù)變性 1循環(huán) 95℃ for 10 min
PCR擴(kuò)增 40循環(huán) 95℃ for 15 sec
60℃ for 60 sec
在60℃延伸時收集熒光信號。報告基團(tuán)：設(shè)置為FAM。淬滅基團(tuán)：NONE，請勿選擇ROX參比熒光。
碲標(biāo)準(zhǔn)溶液(100μg/ml，基體:HCI)Phospho-SLP-76 (Ser376) (D7S1K) XP® Rabbit mAb (PE Conjuga)酸氫氨鈉

銩標(biāo)準(zhǔn)溶液(1000µg/mL,基體：10%HCL)Phospho-SLP-76 (Ser376) (D7S1K) XP® Rabbit mAb (PE Conjuga)5,6-二氫-4H-吡咯并[3,2,1-IJ]喹啉

釩標(biāo)準(zhǔn)溶液(500mg/L,溶劑：水)FANCD2 (D5L5X) Rabbit mAb硝基-1,二硫酸鹽

釩標(biāo)準(zhǔn)溶液(100mg/L,基體:1%HCI)HUS1 (D4J9H) Rabbit mAb5-溴-2-(硫代甲基)嘧啶

鐿標(biāo)準(zhǔn)溶液(1000μg/ml)BCAT1 (D4V2T) Rabbit mAbN,N-二異基三鹽

鐿標(biāo)準(zhǔn)溶液(1000μg/ml in 10%HCl)Phospho-Met (Tyr1234/1235) Blocking Peptide4,5-二-2-甲基噠-酮

鋅標(biāo)準(zhǔn)溶液(1000mg/L,溶劑：1%鹽酸)Ibrutinib3,4',5-*氧基-反-二代

鋅標(biāo)準(zhǔn)溶液(500mg/L,溶劑：1%鹽酸)ROR1 (D6T8C) Rabbit mAb2-ACETAMIDO-BROMOANISOLE

二溴一標(biāo)準(zhǔn)溶液(1.0mg/ml,基體：甲)MUC1-C (D5K9I) XP® Rabbit mAb甲基-1-萘甲酸

2,二甲酚標(biāo)準(zhǔn)溶液(1000μg/ml,溶劑：甲)ERG (A7L1G) Rabbit mAb (PE Conjuga)METHYL IMIDAZO[1,2-A]PYRIDINE-5-CARBOXYLA

3,二甲酚標(biāo)準(zhǔn)溶液(1000μg/ml,溶劑：甲)TKS5 Antibody3,4'-二氨基二烷

鄰二甲酸二酯標(biāo)準(zhǔn)溶液(1000μg/ml,溶劑：甲)TRPC6 (D3G1Q) Rabbit mAbN,N'-基雙酰

鄰二甲酸二丁酯標(biāo)準(zhǔn)溶液(1000μg/ml,溶劑：甲)Phospho-CaMKK2 (Ser495) Antibody雙(2,2,6,6-四甲基-3,5-庚二酮)化銅

2,二溴酰標(biāo)準(zhǔn)溶液(490mg/L,基體:酸酯)Orexin (D6G9T) Rabbit mAb氧基

1,1-二烷標(biāo)準(zhǔn)溶液(1.00mg/ml,基體:甲)CaMKK2 (D8D4D) Rabbit mAb

反式-1,2-二標(biāo)準(zhǔn)溶液(1.00mg/ml,基體:甲)eIF4E (C46H6) Rabbit mAb (Biotinylad)7-甲氧基咪唑并[1,2-A]吡啶-8-甲

鄰二甲酸二正壬酯標(biāo)準(zhǔn)溶液(136.0μg/ml,溶劑:甲)SIX1 (D5S2S) Rabbit mAb6-酰氧基正己酸甲酯

標(biāo)準(zhǔn)溶液(1000μg/ml,溶劑：二硫化碳)CAR (D3W3G) Rabbit mAb1-BOC-5-(METHOXYCARBONYL)INDOLE-2-BORONIC ACID

包蟲IgG ELISA試劑盒Inhibin Beta C  抑制素βC20 ul

膀胱腫瘤抗原(BTA)ELISA試劑盒Insulin  胰島素100 ul

膀胱癌抗原(UBC)ELISA試劑盒Insulin (pig)  胰島素 （豬）100 ul

伴侶蛋白10(CPN10)ELISA試劑盒rInsulin   抗重組胰島素100 ul

半糖凝集素-7(Gal-7)ELISA試劑盒rInsulin monoclonal (pig)  抗胰島素（豬）100 ul

半糖(Galactose)ELISA試劑盒rInsulin human monoclonal  重組胰島素100 ul

板層素相關(guān)多肽2亞型α(TMPO)ELISA試劑盒Insulin Receptor  胰島素受體100 ul

瘢痕性天皰瘡(CP)ELISA試劑盒Insulin Receptor alpha  胰島素受體α100 ul

百日咳病毒(IgM)ELISA試劑盒Insulin Receptor Alpha  胰島素受體α100 ul
人線粒體DNAPCR檢測試劑盒價格細(xì)胞色素P450 19抗體Hirsutal中文名：別名：分子式：C19H22O6

16號染色體開放閱讀框48抗體Ehretioside B中文名：別名：分子式：C14H177

間隙連接蛋白36抗體5-(6-Hydroxybenzofuran-2-yl)-2-(3-methylbut-1-enyl)benzene-1,3-diol中文名：別名：分子式：C19H18O4

12號染色體開放閱讀框61抗體Resorcil中文名：別名：1,3-Benzenediol分子式：C6H6O2

12號染色體開放閱讀框63抗體Moracin C中文名：桑辛素C別名：分子式：C19H18O4