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腺素(T4)(IgG)ELISA試劑盒RAMP-1 受體活性修飾蛋白1100 ul抗甲狀腺球蛋白(ATGA/TGAB)ELISA試劑盒RACK1 受體激活蛋白激酶C1100 ul抗甲狀腺過氧化物酶(TPO-Ab)ELISA試劑盒PRMT1 蛋白質精氨酸甲基轉
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1、酶標板:一塊(96孔)
2、 標準品(凍干品): 2瓶,請臨用前15分鐘內配制。每瓶以樣品稀釋液稀釋至0.5ml,蓋好后室溫靜置大約10分鐘,同時反復顛倒/搓動以助溶解,其濃度為200 U/L,然后做系列倍比稀釋(注:不要直接在板中進行倍比稀釋),分別配制成200 U/L,100 U/L,50 U/L,25 U/L,12.5 U/L,6.25 U/L,3.12 U/L,樣品稀釋液直接作為空白孔 0 U/L。如配制100 U/L標準品:取0.3ml (不要少于0.3ml )200 U/L的上述標準品加入含有0.3ml樣品稀釋液的Eppendorf管中,混勻即可,其余濃度以此類推。
3、 樣品稀釋液:1×20ml。
4、 檢測稀釋液A:1×10ml。
5、 檢測稀釋液B:1×10ml。
注意事項:1.基礎程序;2.擴增溫度和延伸溫度;3.反應時間;4.循環(huán)次數(shù);5.PCR 反應液的配制;6.PCR技術的基本原理;7.PCR的反應動力學;8.PCR擴增產物;9.PCR反應體系與反應條件。
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產品名稱 | 質型多角體病毒PCR檢測試劑盒廠家 |
規(guī)格 | 50T |
貨號 | LZP7890 |
實驗過程:
一、試劑準備
1. DNA模板
2.對應目的基因的特異引物(在PCR反應中,新合成的DNA是要接在一小段序列上才能繼續(xù)按照模板DNA復制,而不能從無到有,憑空合成。這一小段序列就是你所要有設計的引物??梢允荄NA也可以是RNA,一般20多bp,需要根據(jù)你的模板鏈設計。因此,擴增不同的基因需要設計不同的引物)
3.10×PCR Buffer
4.2mM dNTPmix:含dATP、dCTP、dGTP、dTTP各2mM
5.Taq酶
二、操作步驟
1.在冰浴中,按以下次序將各成分加入一無菌0.5ml離心管中。
10×PCR buffer 5μl
dNTP mixl 4μl
引物1(10pM) 2μl
引物2(10PM) 2μl
Taq酶(2U/μl) 1μl
DNA模板(50ng-1μg/μl) 1 μl
加ddH2O至 50 μl
視PCR儀有無熱蓋,不加或添加石蠟油。
2.調整好反應程序。將上述混合液稍加離心,立即置PCR儀上,執(zhí)行擴增。一般:在93℃預變性3-5min,進入循環(huán)擴增階段:93℃ 40s → 58℃ 30s → 72℃ 60s,循環(huán)30-35次,zui后在72℃ 保溫7min。
3.結束反應,PCR產物放置于4℃待電泳檢測或-20℃長期保存。
4.PCR的電泳檢測:如在反應管中加有石蠟油,需用100μlLuFang進行抽提反應混合液,以除去石蠟油;否則,直接取5-10μl電泳檢測。
三、注意事項
1.PCR反應應該在一個沒有DNA污染的干凈環(huán)境中進行設立一個的PCR實驗室。
2.純化模板所選用的方法對污染的風險有極大影響。一般而言,只要能夠得到可靠的結果,純化的方法越簡單越好。
3.所有試劑都應該沒有核酸和核酸酶的污染。操作過程中均應戴手套。
4.PCR試劑配制應使用zui高質量的新鮮雙蒸水,采用0.22μm濾膜過濾除菌或高壓滅菌。
5.試劑都應該以大體積配制,試驗一下是否滿意,然后分裝成僅夠一次使用的量儲存,從而確保實驗與實驗之間的連續(xù)性。
6.試劑或樣品準備過程中都要使用一次性滅菌的塑料瓶和管子,玻璃器皿應洗滌干凈并高壓滅菌。
7.PCR的樣品應在冰浴上化開,并且要充分混勻。檢測步驟:
一、 試劑的準備
從試劑盒中取出熒光PCR反應液(BC-qPCR MIX)、酶混合物(Enzymes MIX),冰上融化并振蕩混勻后,10000rpm離心10s。
設所需要的PCR反應管管數(shù)為N(N=樣本數(shù)+1管陰性對照+1管陽性對照),每個測試反應體系配制如下表:
試劑 每個反應加入的量 N個反應加入的量
熒光PCR反應液 14µL N×14µL
酶混合物 1 µL N×1 µL
總量 15 µL N×15µL
(1) 計算好各試劑的使用量,加入一適當體積潔凈離心管中,充分混勻,10000rpm離心10s,向設定的N個PCR反應管中分別加入15μL熒光PCR反應液,向每管中加入處理后樣品或陰性對照(NTC)和陽性對照(BC-PTC)5μL,10000rpm瞬時離心10秒。
7.2 qPCR反應條件
將各反應管放入定量PCR儀器的反應槽內。
推薦循環(huán)條件:
1循環(huán) 50℃ for 2 min
預變性 1循環(huán) 95℃ for 10 min
PCR擴增 40循環(huán) 95℃ for 15 sec
60℃ for 60 sec
在60℃延伸時收集熒光信號。報告基團:設置為FAM。淬滅基團:NONE,請勿選擇ROX參比熒光。
四溴熒光素鹽(>85.0%(HPLC))Phospho-FAK (Tyr576/577) Antibody2-溴-5-硝基-甲基吡啶
溶劑紅 48(>98.0%(HPLC)(T))Phospho-FAK (Tyr576/577) AntibodyN-基-哌啶酮
3,4,5,6-四熒光素Phospho-FAK (Tyr397) Antibody三氟
赤蘚紅B(>95.0%(E))Phospho-FAK (Tyr925) AntibodyL-谷氨酸二甲酯鹽酸鹽
結晶紫九水合物(>95.0%(T))Phospho-FAK (Tyr925) Antibody溴-羥基
四()酸(>98.0%(HPLC)(W))FAK Antibody1-(氨基基)吡咯烷
2-氨基白啶氫溴化物(>98.0%(T))FAK Antibody熒光素
CPC一水合物(=西吡銨一水合物)(>98.0%(HPLC)(T))GPX1 (C8C4) Rabbit mAb2,5-二溴吡
MDEPAP [=化1-甲基-(二氨基偶氮)吡啶鹽](>95.0%(HPLC)(N))ROS1 (D4D6®) Rabbit mAb間三氟
鄰甲酚酞絡合鈉鹽ROS1 (D4D6®) Rabbit mAb2-溴代異丁酸甲酯
百里酚酞氨羧絡合劑EEA1 (C45B10) Rabbit mAb四氫-2H-吡喃-酮
鈣黃綠素藍(>98.0%(T))EEA1 (C45B10) Rabbit mAb氟-三氟
甲基二甲酚藍(>85.0%(HPLC))5-Lipoxygenase (C49G1) Rabbit mAb溴-2-酚
1,2-雙(2-氨基氧基)烷-N,N,N',N'-四酸(>97.0%(HPLC))Endoglin Antibody (Mouse Specific)溴-甲酸甲酯
反-1,2-環(huán)己二四酸一水合物(>99.0%(T))Phospho-Pyk2 (Tyr402) Antibody氨基-氟甲酸
二亞基三五酸(>98.0%(T))Pyk2 Antibody1-溴-2,4,6-三氟
1,2-二氨基烷-N,N,N',N'-四酸(>98.0%(T))Annexin A1 (D5V2T) XP® Rabbit mAbN-BOC-O-芐基-L-絲氨酸
1,二氨基-2--N,N,N',N'-四酸(>98.0%(T))Annexin A1 (D5V2T) XP® Rabbit mAb8-氨基異喹啉
抗內皮細胞(AECA)ELISA試劑盒X proin (C-rminus) 抗肝病毒X蛋白(C端)300 ul
抗鏈球菌溶血素O(IgG)ELISA試劑盒Profilin 2 前纖維蛋白2100 ul
抗利尿激素/血管加壓素/精氨酸加壓素(ADH/VP/AVP)ELISA試劑盒Proin G 重組蛋白G100 ul
抗酸性酸酶5b(TRACP-5b)ELISA試劑盒Proin A 重組蛋白A20 ul
抗(AsAb)ELISA試劑盒RAM-11 RAM-11300 ul
抗甲狀腺素(T4)(IgG)ELISA試劑盒RAMP-1 受體活性修飾蛋白1100 ul
抗甲狀腺球蛋白(ATGA/TGAB)ELISA試劑盒RACK1 受體激活蛋白激酶C1100 ul
抗甲狀腺過氧化物酶(TPO-Ab)ELISA試劑盒PRMT1 蛋白質精氨酸甲基轉移酶1100 ul
抗肌內膜IgA(EMA IgA)ELISA試劑盒PRCP 脯氨酰羧肽酶20 ul
質型多角體病毒PCR檢測試劑盒廠家三磷酸腺苷酶家族蛋白3A抗體Tabersonine中文名:它波寧別名:柳葉甘草堿分子式:C21H24N2O2
載脂蛋白J抗體Aristolactam AIIIa中文名:馬兜鈴內酰胺AIIIa別名:分子式:C16H114
載脂蛋白H抗體Ervamycine中文名:11-甲氧基它波寧別名:11-Methoxytabersonine分子式:C22H26N2O3
二磷酸腺苷核糖基轉移酶4抗體Seneciphyllinine中文名:別名:12-Acetylseneciphylline分子式:C20H256
AKIRIN2蛋白抗體Corydalmine中文名:紫堇單酚堿別名:分子式:C20H234