組成及試劑配制:
1、酶標(biāo)板：一塊（96孔）
2、 標(biāo)準(zhǔn)品（凍干品）： 2瓶，請(qǐng)臨用前15分鐘內(nèi)配制。每瓶以樣品稀釋液稀釋至0.5ml，蓋好后室溫靜置大約10分鐘，同時(shí)反復(fù)顛倒/搓動(dòng)以助溶解，其濃度為200 U/L，然后做系列倍比稀釋（注：不要直接在板中進(jìn)行倍比稀釋），分別配制成200 U/L，100 U/L，50 U/L，25 U/L，12.5 U/L，6.25 U/L，3.12 U/L，樣品稀釋液直接作為空白孔 0 U/L。如配制100 U/L標(biāo)準(zhǔn)品：取0.3ml （不要少于0.3ml ）200 U/L的上述標(biāo)準(zhǔn)品加入含有0.3ml樣品稀釋液的Eppendorf管中，混勻即可，其余濃度以此類(lèi)推。
3、 樣品稀釋液：1×20ml。
4、 檢測(cè)稀釋液A：1×10ml。
5、 檢測(cè)稀釋液B：1×10ml。
注意事項(xiàng)：1．基礎(chǔ)程序；2．?dāng)U增溫度和延伸溫度；3．反應(yīng)時(shí)間；4．循環(huán)次數(shù)；5．PCR 反應(yīng)液的配制；6．PCR技術(shù)的基本原理；7．PCR的反應(yīng)動(dòng)力學(xué)；8．PCR擴(kuò)增產(chǎn)物；9．PCR反應(yīng)體系與反應(yīng)條件。

?

實(shí)驗(yàn)過(guò)程：
一、試劑準(zhǔn)備
1. DNA模板
2．對(duì)應(yīng)目的基因的特異引物（在PCR反應(yīng)中，新合成的DNA是要接在一小段序列上才能繼續(xù)按照模板DNA復(fù)制，而不能從無(wú)到有，憑空合成。這一小段序列就是你所要有設(shè)計(jì)的引物。可以是DNA也可以是RNA，一般20多bp，需要根據(jù)你的模板鏈設(shè)計(jì)。因此，擴(kuò)增不同的基因需要設(shè)計(jì)不同的引物）
3．10×PCR Buffer
4．2mM dNTPmix：含dATP、dCTP、dGTP、dTTP各2mM
5．Taq酶
二、操作步驟
1．在冰浴中，按以下次序?qū)⒏鞒煞旨尤胍粺o(wú)菌0.5ml離心管中。
10×PCR buffer             5μl
dNTP mixl                 4μl
引物1（10pM）               2μl
引物2（10PM）              2μl
Taq酶（2U/μl）            1μl
DNA模板（50ng-1μg/μl）　　　 1 μl
加ddH2O至               50 μl
視PCR儀有無(wú)熱蓋，不加或添加石蠟油。
2．調(diào)整好反應(yīng)程序。將上述混合液稍加離心，立即置PCR儀上，執(zhí)行擴(kuò)增。一般：在93℃預(yù)變性3-5min，進(jìn)入循環(huán)擴(kuò)增階段：93℃ 40s → 58℃ 30s → 72℃ 60s，循環(huán)30-35次，zui后在72℃ 保溫7min。
3．結(jié)束反應(yīng)，PCR產(chǎn)物放置于4℃待電泳檢測(cè)或-20℃長(zhǎng)期保存。
4．PCR的電泳檢測(cè)：如在反應(yīng)管中加有石蠟油，需用100μlLuFang進(jìn)行抽提反應(yīng)混合液，以除去石蠟油；否則，直接取5-10μl電泳檢測(cè)。
三、注意事項(xiàng)
１．PCR反應(yīng)應(yīng)該在一個(gè)沒(méi)有DNA污染的干凈環(huán)境中進(jìn)行設(shè)立一個(gè)的PCR實(shí)驗(yàn)室。
２．純化模板所選用的方法對(duì)污染的風(fēng)險(xiǎn)有極大影響。一般而言，只要能夠得到可靠的結(jié)果，純化的方法越簡(jiǎn)單越好。
３．所有試劑都應(yīng)該沒(méi)有核酸和核酸酶的污染。操作過(guò)程中均應(yīng)戴手套。
４．PCR試劑配制應(yīng)使用zui高質(zhì)量的新鮮雙蒸水，采用0.22μm濾膜過(guò)濾除菌或高壓滅菌。
５．試劑都應(yīng)該以大體積配制，試驗(yàn)一下是否滿意，然后分裝成僅夠一次使用的量?jī)?chǔ)存，從而確保實(shí)驗(yàn)與實(shí)驗(yàn)之間的連續(xù)性。
６．試劑或樣品準(zhǔn)備過(guò)程中都要使用一次性滅菌的塑料瓶和管子，玻璃器皿應(yīng)洗滌干凈并高壓滅菌。
７．PCR的樣品應(yīng)在冰浴上化開(kāi)，并且要充分混勻。檢測(cè)步驟：
一、 試劑的準(zhǔn)備
從試劑盒中取出熒光PCR反應(yīng)液(BC-qPCR MIX)、酶混合物(Enzymes MIX)，冰上融化并振蕩混勻后，10000rpm離心10s。
設(shè)所需要的PCR反應(yīng)管管數(shù)為N(N=樣本數(shù)+1管陰性對(duì)照+1管陽(yáng)性對(duì)照)，每個(gè)測(cè)試反應(yīng)體系配制如下表：
試劑 每個(gè)反應(yīng)加入的量 N個(gè)反應(yīng)加入的量
熒光PCR反應(yīng)液 14µL N×14µL
酶混合物 1 µL N×1 µL
總量 15 µL N×15µL
（1） 計(jì)算好各試劑的使用量，加入一適當(dāng)體積潔凈離心管中，充分混勻，10000rpm離心10s，向設(shè)定的N個(gè)PCR反應(yīng)管中分別加入15μL熒光PCR反應(yīng)液，向每管中加入處理后樣品或陰性對(duì)照(NTC)和陽(yáng)性對(duì)照(BC-PTC)5μL，10000rpm瞬時(shí)離心10秒。
7.2 qPCR反應(yīng)條件
將各反應(yīng)管放入定量PCR儀器的反應(yīng)槽內(nèi)。
推薦循環(huán)條件:
1循環(huán) 50℃ for 2 min
預(yù)變性 1循環(huán) 95℃ for 10 min
PCR擴(kuò)增 40循環(huán) 95℃ for 15 sec
60℃ for 60 sec
在60℃延伸時(shí)收集熒光信號(hào)。報(bào)告基團(tuán)：設(shè)置為FAM。淬滅基團(tuán)：NONE，請(qǐng)勿選擇ROX參比熒光。
淋巴細(xì)胞分離液使用說(shuō)明書(shū)Anti-Manic Fringe/MFNG研究領(lǐng)域  腫瘤 心血管 細(xì)胞生物 神經(jīng)生物學(xué) 信號(hào)轉(zhuǎn)導(dǎo) 激酶和磷酸酶 新陳代謝

人β-連環(huán)蛋白（CTNNB1/CTNNB/OK/SW-cl.35/PRO2286）elisa分析檢測(cè)Anti-Mib1/Mindbomb研究領(lǐng)域  腫瘤 神經(jīng)生物學(xué) 信號(hào)轉(zhuǎn)導(dǎo) 通道蛋白 細(xì)胞膜受體 新陳代謝

大鼠胱天蛋白酶3（Casp-3）elisa試劑盒Anti-MAML1研究領(lǐng)域  腫瘤 細(xì)胞生物 免疫學(xué) 神經(jīng)生物學(xué) 信號(hào)轉(zhuǎn)導(dǎo) 轉(zhuǎn)錄調(diào)節(jié)因子

McCoy's 5A*培養(yǎng)基（不含HEPES）?說(shuō)明書(shū)Anti-MAML2研究領(lǐng)域  淋巴細(xì)胞 t-淋巴細(xì)胞 b-淋巴細(xì)胞

蛋白酶K使用說(shuō)明書(shū)Anti-MAPK6/ERK3研究領(lǐng)域

大鼠胱天蛋白酶9（Casp-9）elisa試劑盒Anti-MISRII/AMHR2研究領(lǐng)域  腫瘤 細(xì)胞生物 免疫學(xué) 信號(hào)轉(zhuǎn)導(dǎo) 細(xì)胞凋亡 細(xì)胞類(lèi)型標(biāo)志物 細(xì)胞骨架 腫瘤細(xì)胞生物標(biāo)志物 細(xì)胞外基質(zhì)

大鼠骨形態(tài)形成蛋白拮抗蛋白elisa試劑盒Anti-Mst2研究領(lǐng)域  腫瘤 細(xì)胞生物 免疫學(xué) 干細(xì)胞 細(xì)胞凋亡 糖蛋白 細(xì)胞類(lèi)型標(biāo)志物 t-淋巴細(xì)胞

35mm玻底培養(yǎng)皿使用說(shuō)明書(shū)Anti-MUC13研究領(lǐng)域

人神經(jīng)干細(xì)胞無(wú)血清培養(yǎng)基現(xiàn)貨供應(yīng)Anti-MTERF1研究領(lǐng)域  神經(jīng)生物學(xué) 細(xì)胞粘附分子

WGA 糖蛋白分離試劑盒10 次哪里有賣(mài)Anti-MCT1研究領(lǐng)域  神經(jīng)生物學(xué) 信號(hào)轉(zhuǎn)導(dǎo) 通道蛋白

SYBR Green 1 熒光染料使用說(shuō)明書(shū)Anti-MOF/KAT8/MYST1研究領(lǐng)域  信號(hào)轉(zhuǎn)導(dǎo) 轉(zhuǎn)錄調(diào)節(jié)因子 激酶和磷酸酶

人結(jié)腸平滑肌細(xì)胞說(shuō)明書(shū)Anti-MBOAT4/Ghrelin O acyltransferase研究領(lǐng)域  神經(jīng)生物學(xué) 信號(hào)轉(zhuǎn)導(dǎo) 激酶和磷酸酶

靛藍(lán)胭脂紅實(shí)驗(yàn)步驟Anti-MHC class I/HLA-A研究領(lǐng)域  細(xì)胞生物 轉(zhuǎn)錄調(diào)節(jié)因子 表觀遺傳學(xué)

大鼠黑色素細(xì)胞抗體（MC Ab）elisa試劑盒Anti-MHC Class II/ HLA-DMB研究領(lǐng)域  信號(hào)轉(zhuǎn)導(dǎo) 細(xì)胞骨架 細(xì)胞外基質(zhì)

環(huán)磷酸腺苷價(jià)格Anti-MS4A2研究領(lǐng)域  細(xì)胞生物 免疫學(xué) 神經(jīng)生物學(xué) 細(xì)胞膜受體

銀杏內(nèi)酯JMK(Midkine)  中期因子/肝素結(jié)合生長(zhǎng)因子抗原TNFRSF12A/TWEAKR/CD266  腫瘤壞死因子配體超家族成員12A抗體

特女貞苷MLC/Myosin light chain 3 peptide  肌球蛋白輕鏈3抗原TNFR2/TRAF2/CD120b  腫瘤壞死因子受體相關(guān)因子2抗體

京尼平苷酸MIF (Macrophage Migration Inhibitory Factor)  巨噬細(xì)胞移動(dòng)抑制因子抗原TNFR1/TNF Receptor I  腫瘤壞死因子受體1抗體

川續(xù)斷皂苷乙MIP-1 Beta (macrophage inflammatory protein 1 Beta)  巨噬細(xì)胞炎癥因子1β 抗原TNFC/lymphotoxin Beta  腫瘤壞死因子C/淋巴毒素β抗體

山梔苷甲酯CD122/IL-2RB(Imterleukm-2 Receptor beta)  CD122/白介素2受體β鏈抗原TNF-alpha(1F6)  腫瘤壞死因子-α單克隆抗體

表告依春MIP2 (myocardial ischemic preconditioning upregulated protein 2)  巨噬細(xì)胞炎癥蛋白2抗原TNF-alpha  腫瘤壞死因子-α抗體

大車(chē)前苷MMP-13 (Matrix metalloproteinase 13)  基質(zhì)金屬蛋白酶13抗原TNFAIP8  腫瘤壞死因子α誘導(dǎo)蛋白8抗體

8-O-乙酰山梔苷甲酯MMP-20(matrix metalloproteinase 20)  基質(zhì)金屬蛋白酶20抗原TNFAIP5/Pentraxin 3  腫瘤壞死因子α誘導(dǎo)蛋白5

晶蘭苷MMP-17(Matrix metalloproteinase-17)  基質(zhì)金屬蛋白酶-17抗原TNFAIP3 interacting protein 3/ABIN3  腫瘤壞死因子α誘導(dǎo)相互作用蛋白3抗體

黃杞苷MMP-26(Matrix metalloproteinase-26)  基質(zhì)金屬蛋白酶-26抗原TNFAIP3  腫瘤壞死因子α誘導(dǎo)蛋白3抗體
火雞支原體PCR檢測(cè)試劑盒規(guī)格人β乳糖蛋白抗體IgGELISA試劑盒  *shēng huà shì jì  容量：1公斤

人β-微管蛋白(TUBB)ELISA試劑盒  *shēng huà shì jì  容量：1750ku

人β位淀粉樣前體蛋白裂解酶1（BACE1）ELISA試劑盒  *shēng huà shì jì  容量：RT10克

人β位淀粉樣前體蛋白裂解酶2(BACE2)ELISA試劑盒  *shēng huà shì jì  容量：RT1克

人β細(xì)胞素(BTC)ELISA試劑盒  *shēng huà shì jì  容量：500克

人β血小板球蛋白/β血栓環(huán)蛋白(β-TG)ELISA試劑盒  *shēng huà shì jì  容量：100克

人γ氨基丁酸(GABA)ELISA試劑盒  *shēng huà shì jì  容量：RT，避光100克

人γ干擾素(IFN-γ)ELISA試劑盒  *shēng huà shì jì  容量：保存：-20℃25毫克