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絲狀支原體簇PCR檢測(cè)試劑盒價(jià)格上海聯(lián)祖生物相關(guān)產(chǎn)品:ALOX-5檢測(cè)試劑盒制備抗體的傳統(tǒng)方法是用純制的抗原多次接種于適當(dāng)?shù)某赡杲】祫?dòng)物
產(chǎn)品分類
PRODUCT CLASSIFICATION相關(guān)文章
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產(chǎn)品名稱 | 絲狀支原體簇PCR檢測(cè)試劑盒價(jià)格 |
英文名稱 | Mycoplasma mycoides clusterPCR |
貨號(hào) | LZP7037 |
組成及試劑配制:
1、酶標(biāo)板:一塊(96孔)
2、 標(biāo)準(zhǔn)品(凍干品): 2瓶,請(qǐng)臨用前15分鐘內(nèi)配制。每瓶以樣品稀釋液稀釋至0.5ml,蓋好后室溫靜置大約10分鐘,同時(shí)反復(fù)顛倒/搓動(dòng)以助溶解,其濃度為200 U/L,然后做系列倍比稀釋(注:不要直接在板中進(jìn)行倍比稀釋),分別配制成200 U/L,100 U/L,50 U/L,25 U/L,12.5 U/L,6.25 U/L,3.12 U/L,樣品稀釋液直接作為空白孔 0 U/L。如配制100 U/L標(biāo)準(zhǔn)品:取0.3ml (不要少于0.3ml )200 U/L的上述標(biāo)準(zhǔn)品加入含有0.3ml樣品稀釋液的Eppendorf管中,混勻即可,其余濃度以此類推。
3、 樣品稀釋液:1×20ml。
4、 檢測(cè)稀釋液A:1×10ml。
5、 檢測(cè)稀釋液B:1×10ml。
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實(shí)驗(yàn)過程:
一、試劑準(zhǔn)備
1. DNA模板
2.對(duì)應(yīng)目的基因的特異引物(在PCR反應(yīng)中,新合成的DNA是要接在一小段序列上才能繼續(xù)按照模板DNA復(fù)制,而不能從無(wú)到有,憑空合成。這一小段序列就是你所要有設(shè)計(jì)的引物??梢允荄NA也可以是RNA,一般20多bp,需要根據(jù)你的模板鏈設(shè)計(jì)。因此,擴(kuò)增不同的基因需要設(shè)計(jì)不同的引物)
3.10×PCR Buffer
4.2mM dNTPmix:含dATP、dCTP、dGTP、dTTP各2mM
5.Taq酶
二、操作步驟
1.在冰浴中,按以下次序?qū)⒏鞒煞旨尤胍粺o(wú)菌0.5ml離心管中。
10×PCR buffer 5μl
dNTP mixl 4μl
引物1(10pM) 2μl
引物2(10PM) 2μl
Taq酶(2U/μl) 1μl
DNA模板(50ng-1μg/μl) 1 μl
加ddH2O至 50 μl
視PCR儀有無(wú)熱蓋,不加或添加石蠟油。
2.調(diào)整好反應(yīng)程序。將上述混合液稍加離心,立即置PCR儀上,執(zhí)行擴(kuò)增。一般:在93℃預(yù)變性3-5min,進(jìn)入循環(huán)擴(kuò)增階段:93℃ 40s → 58℃ 30s → 72℃ 60s,循環(huán)30-35次,zui后在72℃ 保溫7min。
3.結(jié)束反應(yīng),PCR產(chǎn)物放置于4℃待電泳檢測(cè)或-20℃長(zhǎng)期保存。
4.PCR的電泳檢測(cè):如在反應(yīng)管中加有石蠟油,需用100μlLuFang進(jìn)行抽提反應(yīng)混合液,以除去石蠟油;否則,直接取5-10μl電泳檢測(cè)。
三、注意事項(xiàng)
1.PCR反應(yīng)應(yīng)該在一個(gè)沒有DNA污染的干凈環(huán)境中進(jìn)行設(shè)立一個(gè)的PCR實(shí)驗(yàn)室。
2.純化模板所選用的方法對(duì)污染的風(fēng)險(xiǎn)有極大影響。一般而言,只要能夠得到可靠的結(jié)果,純化的方法越簡(jiǎn)單越好。
3.所有試劑都應(yīng)該沒有核酸和核酸酶的污染。操作過程中均應(yīng)戴手套。
4.PCR試劑配制應(yīng)使用zui高質(zhì)量的新鮮雙蒸水,采用0.22μm濾膜過濾除菌或高壓滅菌。
5.試劑都應(yīng)該以大體積配制,試驗(yàn)一下是否滿意,然后分裝成僅夠一次使用的量?jī)?chǔ)存,從而確保實(shí)驗(yàn)與實(shí)驗(yàn)之間的連續(xù)性。
6.試劑或樣品準(zhǔn)備過程中都要使用一次性滅菌的塑料瓶和管子,玻璃器皿應(yīng)洗滌干凈并高壓滅菌。
7.PCR的樣品應(yīng)在冰浴上化開,并且要充分混勻。
小鼠生長(zhǎng)抑素(SS)elisa試劑盒Anti-MYL3/Myosin light chain 3研究領(lǐng)域 腫瘤 細(xì)胞粘附分子 細(xì)胞表面分子
人FractalkineElisa Kit圖片Anti-Mesothelioma研究領(lǐng)域 腫瘤 細(xì)胞生物 免疫學(xué) 干細(xì)胞
大鼠果糖胺(FRA)elisa試劑盒Anti-Mitochondrial ribosomal protein L11研究領(lǐng)域 腫瘤 心血管 細(xì)胞生物 免疫學(xué) 信號(hào)轉(zhuǎn)導(dǎo) 干細(xì)胞 細(xì)胞粘附分子 細(xì)胞表面分子 糖蛋白 細(xì)胞類型標(biāo)志物 血管內(nèi)皮細(xì)胞 t-淋巴細(xì)胞 內(nèi)皮細(xì)胞
人N端前腦鈉素(NT-proBNP)elisa試劑盒Anti-Myocardin研究領(lǐng)域 腫瘤 免疫學(xué) 干細(xì)胞 細(xì)胞表面分子 糖蛋白 細(xì)胞類型標(biāo)志物 t-淋巴細(xì)胞
Hanks緩沖液(HBSS)說明書Anti-MIS12研究領(lǐng)域 細(xì)胞生物 免疫學(xué) 神經(jīng)生物學(xué) 信號(hào)轉(zhuǎn)導(dǎo) 干細(xì)胞 轉(zhuǎn)錄調(diào)節(jié)因子 細(xì)胞膜受體 細(xì)胞表面分子 糖蛋白 細(xì)胞類型標(biāo)志物 自然殺傷細(xì)胞 淋巴細(xì)胞 t-淋巴細(xì)胞 b-淋巴細(xì)胞
乙二胺四乙酸二鈉錳鹽使用說明書Anti-MT-ND1研究領(lǐng)域 神經(jīng)生物學(xué) 細(xì)胞膜受體 G蛋白偶聯(lián)受體 G蛋白信號(hào)
A549/DDP(人肺腺癌耐順鉑株)現(xiàn)貨供應(yīng)Anti-MUL1/RNF218研究領(lǐng)域 神經(jīng)生物學(xué) 信號(hào)轉(zhuǎn)導(dǎo) 新陳代謝
紫花牡荊素479-91-4 價(jià)格Anti-Mast Cell Chymase/CHYMASE研究領(lǐng)域 腫瘤 細(xì)胞生物
PBS緩沖液說明書Anti-PKC delta研究領(lǐng)域 神經(jīng)生物學(xué)
小鼠α1抗胰糜蛋白酶(AACT)elisa試劑盒Anti-MID1/Midline-1/RNF59研究領(lǐng)域 細(xì)胞生物 信號(hào)轉(zhuǎn)導(dǎo) 細(xì)胞凋亡
犬催乳素(PRL/LTH)elisa試劑盒Anti-Mammaglobin A研究領(lǐng)域 神經(jīng)生物學(xué) 細(xì)胞膜受體
特級(jí)胎牛血清?現(xiàn)貨供應(yīng)Anti-MIG6/ERRFI1研究領(lǐng)域 腫瘤 信號(hào)轉(zhuǎn)導(dǎo) 上皮細(xì)胞
生物素檢測(cè)試劑盒Anti-ME1研究領(lǐng)域 免疫學(xué) 藥物及化合物
DMEM高糖 (不含丙酮酸鈉,含HEPES、雙抗)說明書Anti-MTTP研究領(lǐng)域 細(xì)胞生物 神經(jīng)生物學(xué) 信號(hào)轉(zhuǎn)導(dǎo) 細(xì)胞粘附分子
牛血紅蛋白使用說明書Anti-MVK研究領(lǐng)域 細(xì)胞生物 免疫學(xué) 細(xì)胞凋亡
阿卡波糖MMP-9(matrix metalloproteinase 9) 基質(zhì)金屬蛋白酶-9抗原TNFAIP2 腫瘤壞死因子誘導(dǎo)蛋白2(TNFα-IP 2)抗體
阿卡波糖(標(biāo)準(zhǔn)品)MMP-10(matrix metalloproteinase 10) 基質(zhì)金屬蛋白酶-10抗原TNFAIP1 腫瘤壞死因子α誘導(dǎo)蛋白1抗體
阿昔洛韋,無(wú)環(huán)鳥苷MPO peptide 髓過氧化物酶抗原TNF β 腫瘤壞死因子-β抗體
阿昔洛韋,無(wú)環(huán)鳥苷(標(biāo)準(zhǔn)品)MRP2 (multidrug resistance-associated protein2) 多藥耐藥相關(guān)蛋白2TNF alpha 腫瘤壞死因子-α/TNFα抗體
腺苷;腺嘌呤核苷MRP5/ABCC5(Multidrug Resistanec-Associated Protein 5) 多藥耐藥相關(guān)蛋白5抗原TNF alpha 腫瘤壞死因子-α/TNFα抗體
腺嘌呤核苷(腺苷)(標(biāo)準(zhǔn)品)MrpL28 (mitochondrial ribosomal protein L28) 線粒體核糖體蛋白L28(抗原)TMUB1 跨膜和泛素樣結(jié)構(gòu)域蛋白1抗體
鹽酸阿地芬寧MLH1(Mutl homolog l gene) 錯(cuò)配修復(fù)蛋白1抗原TMS1/ASC 凋亡相關(guān)斑點(diǎn)樣蛋白ASC抗體
鹽酸阿地芬寧(標(biāo)準(zhǔn)品)MUC5AC/Mucin 5AC(Gastric Mucin M1) 胃粘液素抗原TMPRSS5 跨膜絲氨酸蛋白酶5抗體
醋酸阿拉瑞林/氨瑞林 MTNR1B/MTNR-1B(Melatonin receptor 1B) 褪黑素受體1B抗原TMPRSS4 膜型絲氨酸蛋白酶2抗體
阿侖磷酸鈉MLN(Motilin)peptide 胃動(dòng)素多肽TMIGD1 跨膜TMIGD1蛋白抗體
絲狀支原體簇PCR檢測(cè)試劑盒價(jià)格人γ干擾素誘導(dǎo)單核細(xì)胞因子(MIGF/CXCL9)ELISA試劑盒 *shēng huà shì jì 容量:25克
人γ干擾素誘導(dǎo)蛋白16/p16(IFI16/p16)ELISA試劑盒 *shēng huà shì jì 容量:2~8℃5克
人γ谷氨酰半胱氨酸合成酶(γ-ECS)ELISA試劑盒 *shēng huà shì jì 容量:1毫升
人γ谷氨酰轉(zhuǎn)移酶(GGT)ELISA試劑盒 *shēng huà shì jì 容量:25克
人γ肽(Pγ)ELISA試劑盒 *shēng huà shì jì 容量:500克
人ω干擾素(IFN-ω/IFNB)ELISA試劑盒 *shēng huà shì jì 容量:25毫升
人吖啶橙(AO)ELISA試劑盒 *shēng huà shì jì 容量:500克
人阿黑皮素原(POMC)ELISA試劑盒 *shēng huà shì jì 容量:500克
檢測(cè)步驟:
一、 試劑的準(zhǔn)備
從試劑盒中取出熒光PCR反應(yīng)液(BC-qPCR MIX)、酶混合物(Enzymes MIX),冰上融化并振蕩混勻后,10000rpm離心10s。
設(shè)所需要的PCR反應(yīng)管管數(shù)為N(N=樣本數(shù)+1管陰性對(duì)照+1管陽(yáng)性對(duì)照),每個(gè)測(cè)試反應(yīng)體系配制如下表:
試劑 每個(gè)反應(yīng)加入的量 N個(gè)反應(yīng)加入的量
熒光PCR反應(yīng)液 14µL N×14µL
酶混合物 1 µL N×1 µL
總量 15 µL N×15µL
(1) 計(jì)算好各試劑的使用量,加入一適當(dāng)體積潔凈離心管中,充分混勻,10000rpm離心10s,向設(shè)定的N個(gè)PCR反應(yīng)管中分別加入15μL熒光PCR反應(yīng)液,向每管中加入處理后樣品或陰性對(duì)照(NTC)和陽(yáng)性對(duì)照(BC-PTC)5μL,10000rpm瞬時(shí)離心10秒。
7.2 qPCR反應(yīng)條件
將各反應(yīng)管放入定量PCR儀器的反應(yīng)槽內(nèi)。
推薦循環(huán)條件:
1循環(huán) 50℃ for 2 min
預(yù)變性 1循環(huán) 95℃ for 10 min
PCR擴(kuò)增 40循環(huán) 95℃ for 15 sec
60℃ for 60 sec
在60℃延伸時(shí)收集熒光信號(hào)。報(bào)告基團(tuán):設(shè)置為FAM。淬滅基團(tuán):NONE,請(qǐng)勿選擇ROX參比熒光。